化妝品微生物檢驗流程
按照《化妝品安全技術規(guī)范》2015版第五章 微生物檢驗方法對化妝品微生物進行檢驗工作。
微生物檢驗方法總則
1 范圍
本部分規(guī)定了化妝品微生物學檢驗的基本要求。
本部分適用于化妝品樣品的采集、保存及供檢樣品制備。
2 儀器和設備
2.1 天平：0~200g，精確至 0.1g。
2.2 高壓滅菌器。
2.3 振蕩器。
2.4 三角瓶：250mL、150mL。
2.5 玻璃珠。
2.6 玻璃棒。
2.7 滅菌刻度吸管：10mL、1mL。
2.8 恒溫水浴箱。
2.9 均質器或研缽。
2.10 滅菌均質袋。
3 培養(yǎng)基和試劑
3.1 生理鹽水
成分：氯化鈉 8.5g
蒸餾水加至 1000mL
制法：溶解后，分裝到加玻璃珠的三角瓶內，每瓶 90mL，121℃高壓滅菌 20min。
3.2 SCDLP 液體培養(yǎng)基
成分：酪蛋白胨 17g
大豆蛋白胨 3g
氯化鈉 5g
磷酸氫二鉀 2.5g
葡萄糖 2.5g
卵磷脂 1g
吐溫 80 7g
蒸餾水 1000mL
制法：先將卵磷脂在少量蒸餾水中加熱溶解后，再與其他成分混合，加熱溶解，調 pH
為 7.2~7.3 分裝，每瓶 90mL，121℃高壓滅菌 20min。注意振蕩，使沉淀于底層的吐溫 80 充
分混合，冷卻至 25℃左右使用。
注：如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。
3.3 滅菌液體石蠟。
制法：取液體石蠟 50mL，121℃高壓滅菌 20min。
3.4 滅菌吐溫 80。
制法：取吐溫 80 50mL，121℃高壓滅菌 20min。
4 樣品的采集及注意事項
4.1 所采集的樣品，應具有代表性，一般視每批化妝品規(guī)格大小，隨機抽取相應數量的包裝
單位。檢驗時，應從不少于2個包裝單位的樣品中共取 10g 或 10mL。包裝量小于 20g 的樣
品，采樣時可適當增加樣品包裝數量。
4.2 供檢樣品，應嚴格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應有破裂，在檢驗前不得打開，防止樣
品被污染。
4.3 接到樣品后，應立即登記，編寫檢驗序號，并按檢驗要求盡快檢驗。如不能及時檢驗，
樣品應置于室溫陰涼干燥處，不要冷藏或冷凍。
4.4 若只有一個樣品而同時需做多種分析，如微生物、毒理、化學等，則宜先取出部分樣品
做微生物檢驗，再將剩余樣品做其他分析。
4.5 在檢驗過程中，從打開包裝到全部檢驗操作結束，均須防止微生物的再污染和擴散，所
用器皿及材料均應事先滅菌，全部操作應在符合生物安全要求的實驗室中進行。
5 供檢樣品的制備
5.1 液體樣品
5.1.1 水溶性的液體樣品：用滅菌吸管吸取 10mL 樣品加到 90mL 滅菌生理鹽水中，混勻
后，制成 1:10 檢液。
5.1.2 油性液體樣品：取樣品 10g，先加 5mL 滅菌液體石蠟混勻，再加 10mL 滅菌的吐溫
80，在 40℃~44℃水浴中振蕩混合 10min，加入滅菌的生理鹽水 75mL（在 40℃~44℃水浴中
預溫），在 40℃~44℃水浴中乳化，制成 1:10 的懸液。
5.2 膏、霜、乳劑半固體狀樣品
5.2.1 親水性的樣品：稱取 10g，加到裝有玻璃珠及 90mL 滅菌生理鹽水的三角瓶中，充分
振蕩混勻，靜置 15min。用其上清液作為 1:10 的檢液。
5.2.2 疏水性樣品：稱取 10g，置于滅菌的研缽中，加 10mL 滅菌液體石蠟，研磨成粘稠狀，
再加入 10mL 滅菌吐溫 80，研磨待溶解后，加 70mL 滅菌生理鹽水，在 40℃~44℃水浴中充
分混合，制成 1:10 檢液。
5.3 固體樣品
稱取 10g，加到 90mL 滅菌生理鹽水中，充分振蕩混勻，使其分散混懸，靜置后，取上
清液作為 1:10 的檢液。
使用均質器時，則采用滅菌均質袋，將上述水溶性膏、霜、粉劑等，稱 10g 樣品加入
90mL 滅菌生理鹽水，均質 1min~2min；疏水性膏、霜及眉筆、口紅等，稱 10g 樣品，加 10mL
滅菌液體石蠟，10mL 吐溫 80，70mL 滅菌生理鹽水，均質 3min~5min。

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化妝品微生物檢驗標準
《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》2007版中規(guī)定，眼部化妝品、口唇等黏膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品中，菌落總數要<500cfu/ml(g)其他化妝品菌落總數要<1000 cfu/ml(g);霉菌和酵母菌總數要<100cfu/ml(g)。像糞大腸菌群、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌等致病菌在1 g或1mL化妝品中是不得檢出的。
《化妝品生產企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》中規(guī)定：生產過程中半成品儲存間、灌裝間、清潔容器儲存間和更衣室空氣中細菌菌落總數應≤1000 cfu/立方米;灌裝間工作臺表面細菌菌落總數應≤20 cfu/平方米，工人手表面細菌菌落總數應≤300 cfu/只手，并不得檢出致病菌。

化妝品微生物檢驗項目
1、菌落總數：化妝品檢樣經過處理，在一定條件下培養(yǎng)后(如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、pH值、需氧性質等)，1g (1mL）檢樣中所含菌落的總數。所得結果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生長的嗜中性的需氧性和兼性厭氧菌落總數。
2、霉菌和酵母菌總數：化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌數量，以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛(wèi)生狀況。
3、耐熱大腸菌群：—群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌,在44.5℃培養(yǎng)24h—48h能發(fā)酵乳糖產酸并產氣。
4、金黃色葡萄球菌：革蘭氏陽性球菌，呈葡萄狀排列，無芽胞,無莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。
5、銅綠假單胞菌：屬于假單胞菌屬，為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽性，能產生綠膿菌素。此外還能液化明膠,還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在42℃±1℃條件下能生長。

從配料、生產、罐裝、分裝等環(huán)節(jié)，微生物管控成為了化妝品生產的基本盤，是化妝品是否合格的重要標準。一旦微生物“超限”，化妝品將直接危及消費者的健康和安全。健明迪檢測是專業(yè)的化妝品檢測備案服務機構，具備開展化妝品備案檢測，化妝品安全評估、化妝品功效評價等資質。本文總結了健明迪檢測化妝品檢測中心的化妝品微生物檢驗項目及檢驗流程，供參考。